产品名称 | 规格 | ||
Alkaline Phosphatase from Calf Intestine, Molecular Biology Grade 小牛肠碱性磷酸酶(分 子生物学级别) | 1KU |
产品内容
组分 | 名称 | 规格 | 储存条件 |
MP0109-A | 碱性磷酸酶(30 U/μl) | 1000U | -20℃保存 |
MP0109-B | 10× 碱性磷酸酶缓冲液 | 1ml | -20℃保存 |
产品描述
碱性磷酸酶(Phosphatase, Alkaline,ALP,EC 3.1.3.1),是一种含两个相同亚基的二聚体,也是一种约含12%碳水化合物(6%己糖和6%其他中性糖)的糖蛋白,每个ALP分子含4个锌离子和4个二硫键。镁离子存在情况下,ALP可达到最高酶活。AP能催化磷酸单酯水解,比如对硝基苯酚磷酸盐(pNPP)、磷酸苯酯、酚酞磷酸、α-甘油磷酸、β-甘油磷酸、2- 磷酸甘油酸、磷酸丙糖、葡萄糖-6-磷酸、葡萄糖-1-磷酸、果糖-6-磷酸、腺苷-5-磷酸、腺苷-3-磷酸、磷酸烯醇式丙酮酸和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸等。
碱性磷酸酶(ALP)常用来偶联抗体和其他蛋白,从而满足ELISA、WB和组织化学检测上的应用。通常用来蛋白的去磷酸化实验,比如酪蛋白和核酸等。当需要高检测灵敏度时也能用来蛋白标记。还可用在DNA或RNA 的5′-末端去磷酸以防止自连。经碱性磷酸酶的去磷酸化作用后,DNA 或 RNA 还可被放射性标记磷酸盐标记(通过 T4 多核苷酸激酶)。
本品来源于小牛肠(Calf Intestine),与大肠杆菌来源的酶相同,催化所有磷酸单酯的水解,不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解。达分子生物学级别,适用于去除载体DNA片段的5′-末端的磷酸基团。
活性定义
在37℃,pH9.8反应条件,每min内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate,pNPP) 生成1 μmol对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需的酶量定义为1个活性单位 (unit)。
保存与运输方法
保存:-20℃冻存,1年稳定。
运输:冰袋运输。
注意事项
- 本品最佳pH 8-10,最佳酶活受底物类型、底物浓度和离子浓度影响。本品正常保存稳定性很高,在螯合剂存在条件下,经65℃,30min加热处理,99%活性不可逆失活(反应条件不同可能会有例外)。建议失活处理时使用苯酚,可使其完全失活。
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为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。