Filipin Complex 菲律宾菌素复合物;Filipin III 菲律宾菌素 III;Cholesterol probe 胆固醇荧光探针;U 18666A;polyene antibiotic 多烯抗生素;CAS NO:11078-21-0;
产品信息
产品名称 |
产品编号 | 规格 |
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Filipin Complex, ≥70%菲律宾菌素复合物 |
MX5214A-1MG | 1mg | |
Filipin Complex, ≥70%菲律宾菌素复合物 |
MX5214A-5MG | 5mg |
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Filipin Complex, ≥95%菲律宾菌素复合物 | MX5214B-5MG | 5mg |
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Filipin Complex, ≥95%菲律宾菌素复合物 | MX5214B-25MG | 25mg |
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产品描述
菲律宾菌素复合物(Filipin Complex)最早是分离自菲律宾链霉菌(S. filipinensis)培养物的一种多烯大环内酯类抗生素和抗真菌药物,具8种异构体成分,其中菲律宾菌素 III(Filipin III)为主要组分。菲律宾菌素复合物(135 µg/ml)抑制酿酒酵母的细胞生长和线粒体末端电子传递。水溶新溶液和真菌细胞膜上,菲律宾菌素复合物(50 µg/ml)与各种固醇结合,特别是24α-甲基胆固醇、24α-乙基胆固醇和胆固醇,诱导纹孔膜生成和细胞内含物泄露。菲律宾菌素复合物是荧光化合物,能标记生物结构的固醇用于成像分析,最大激发和发射波长分别是338和480nm。
产品特征
1) CAS NO.:11078-21-0
2) 同义名:U-5956
3) 分子式:C35H58O11(for Filipin III)
4) 分子量:654.8
5) 纯度:≥70%(MX5214A);≥95%(MX5214B);
6) 外观:固体
7) 溶解性:溶于DMSO、DMF、乙醇、甲醇
8) 化学结构式:
保存与运输方法
保存:-20℃避光干燥保存,至少2年有效。
运输:室温运输。
注意事项
1) 关于化合物溶解性:产品特性内的“≥”表明溶于标示浓度,但饱和溶解度未知。不同批次化合物溶解度会有差异。
2) 为了让化合物更好的溶解,可通过37℃加热或(和)超声波水浴中震动片刻来处理。若实验所需浓度过大甚至达产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。
3) 菲律宾菌素复合物与胆固醇的相互作用会改变吸收和荧光光谱,为此,在做荧光显微镜成像分析时,使用340-380nm作为激发波长,385-470nm作为发射波长。
4) 菲律宾菌素复合物的结合破坏脂质双分子层结构,因此,不适合用于活细胞染色。
5) 菲律宾菌素复合物的荧光染色漂白非常迅速,因此,染色后样本务必尽快分析。
6) 菲律宾菌素复合物溶液对光和空气都非常敏感。条件允许的话,配置好的溶液分装冻存,且充入惰性气体,-80℃分装冻存,避免反复冻融。
7) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作流程
以下是针对细胞样本的染色方法,仅作参考。用户需根据实际染色样本和染色条件来优化。
1、 储存液的制备
将低温保存的固体平衡至室温至少20min,低速离心后,于无菌工作台内加入适量有机溶剂(比如:无水高质量DMSO)配置成10mg/ml的储存液。
2、工作液的制备
于正式实验前,用PBS、HBSS或其他生理缓冲液稀释储存液,到所需的工作浓度,比如:10-100μg/ml。最佳的工作浓度请参阅文献或自行设置梯度浓度进行摸索。工作液必须现配现用。
2、 染色步骤(室温进行)
应用示例(来自文献,仅做参考)
1) 用Filipin 进行细胞染色,步骤如下:j用DMSO溶解Filipin制备25mg/ml储存液,分装成小份,置于-20℃密封保存后置于干燥盒内。每次小样使用后即丢弃,不可再次冻存。k用生理盐清洗细胞,用1.5%多聚甲醛固定细胞;l用生理盐再次清洗;m用生理盐稀释Filipin制备成50μg/ml Filipin,室温孵育45min;n用生理盐清洗细胞3次;o用360/40nm激发和480/40nm发射滤片并带365nm二色向长带通滤片进行成像分析(其他相似的UV滤片也可以)。【文献来源:PMCID: PMC3626500;PMID: 22325611;】
2) 用Filipin染色检测胆固醇再分布和外流。精子悬液离心后去除培养液,之后立即用溶于PBS的4%多聚甲醛固定30min。清洗2次后,用稀释于PBS的Filipin重悬(工作浓度:83μg/ml),室温标记1h,轻轻震荡,且避光。清洗细胞去除多余Filipin,之后重悬于含0.05% NaN3的PBS中用于短期保存。样本保存在4℃(<1周),用于后续的成像分析或流式评估。流式分析,用UV激发器(355nm)和550/40nm宽带通滤片来检测荧光;成像分析,染色后的精子置于盖玻片上,风干后,用Prolong Diamond抗荧光封片剂减缓荧光漂白,之后用安装有UV滤片组(360/20nm宽带通激发滤片,400nm二向色镜和425nm长带通发射滤片)的荧光显微镜观察。【文献来源:PMCID: PMC6614389;PMID: 31285440;】
PPredominant patterns of fluorescent filipin-cholesterol labelling and the frequency of each of these patterns observed on fixed boar spermatozoa following incubation in capacitating and non-capacitating conditions for 2 h. (A) Uniform filipin labelling was observed across the entire sperm head in non-capacitating cells (1). In capacitating cells, filipin-cholesterol complexes concentrate in the apical and pre-equatorial region of the sperm head (indicated by bracket; 2). As in (2) but there were filipin-cholesterol complexes residing in the post-equatorial region of the sperm head (post-equatorial region indicated by an arrow; 3). Cells that exhibited a loss of filipin-cholesterol complexes were identified by the lower fluorescence when compared to non-responsive cells or those with cholesterol redistribution (indicated by arrows; 4). Scale bar = 10 µm.
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货号 | 名称 | 规格 |
MX5213-500UG | Filipin III (Cholesterol fluorescent probe)胆固醇荧光探针 | 500µg |
MX5214A-1MG | Filipin Complex, ≥70%菲律宾菌素复合物 | 1mg |
MX5214B-5MG | Filipin Complex, ≥95%菲律宾菌素复合物 | 5mg |