细胞膜荧光探针，DiI，DiO，DiD，DiR，DiA，CM-DiI，神经示踪，传统细胞膜荧光探针，CAS：75664-01-6；
订购信息：
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产品名称 |
产品编号 | CAS NO | 规格 | |
| DiIC12(3) perchlorate 细胞膜荧光探针 | MX4041-25MG | 75664-01-6 | 25mg |
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产品描述：
橙红色荧光、亲脂性碳菁染料-DiIC12(3)，是DiI (DiIC18(3))（Cat#：MX4002-10MG）的短链类似物，能比DiI更轻易插入细胞膜。在水中呈弱荧光，一旦插入膜后发强荧光且光相对稳定。脂质环境中具极其高消光系数和短激发态寿命（~1ns）。一旦加入细胞中，染料横向扩散进入质膜。DiIC12(3)是一种亲脂性神经元示踪剂，通常用于标记神经元项目以及其它细胞（特别是内皮细胞）的脂质双分子层。
基本特性：
1）CAS NO：75664-01-6
2）化学名：3H-Indolium, 1-dodecyl-2-(3-(1-dodecyl-1,3-dihydro-3,3-dimethyl-2H-indol-2-ylidene)-1-propenyl)- 3,3-dimethyl-, perchlorate
3）同义名：1,1’-Didodecyl-3,3,3’,3’-tetramethylindocarbocyanine perchlorate 1,1′-二(十二烷基)-3,3,3′,3′-四甲基吲哚碳菁高氯酸盐
4）分子式：C47H73N2O4Cl
5）分子量：765.55
6）纯度：≥95%（HPLC）
7）外观：固体
8）溶解性：溶于DMSO
9）Ex/Em：549/565nm（in DMSO）
10）化学结构式：
保存与运输方法
保存：-20°C避光干燥保存，至少1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
【注意】以下使用方法仅用作参考，可根据具体的实验条件做出调整。
染色液制备
1）储存液制备：用 DMSO或乙醇配置浓度1～5 mM的储存液。例如，取25mg DiIC12(3)（Mw：765.55 g/mol）溶于6.53ml 乙醇中，充分溶解，即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。
2）工作液制备：用合适的缓冲液（如：无血清培养基，HBSS或PBS）稀释储存液，调整到1～5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始，以10倍范围为区间进行最优浓度的摸索。
悬浮细胞染色
1）加入适当体积的染色工作液重悬细胞，使其密度为1×106/mL。
2）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
3）孵育结束，按1000～1500 rpm离心5min。
4）去除上清液，之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。
5）再重复3），4）步骤两次。
贴壁细胞染色
1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2）从培养基中移走盖玻片，滤掉过量培养液，将盖玻片放在潮湿的小室内。
3）在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液，轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
4）37℃孵育细胞2～20min，不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间，之后优化以保证得到均一化的标记结果。
5）吸掉染色工作液，用培养液洗盖玻片2～3次，每次用预温的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10min，然后吸走培养基。
显微镜检测
1）DiD，DiO，DiI和DiR滤光器的选择参见下表：
| 货号 | 荧光探针 | 最大激发/最大发射波长
（Ex/Em） |
滤光片编号 | |
| Omega公司 | Chroma公司 | |||
| MX4041-25MG | DiIC12(3) | 549/565 nm | XF108, XF32 | 41002, 31002 |
| MX4001-10MG | DiO | 484/501 nm | XF100,XF23 41001, 31001 | 41001, 31001 |
| MX4004-25MG | DiD | 644/663 nm | XF110, XF47 | 41008, 31023 |
| MX4005-5MG | DiR | 748/780 nm | XF112 | 41009 |
2）多色染料的同时检测，滤光器按照以下设定：
- a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004；
- b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007；
- c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005；
流式细胞仪检测
经DiO，DiIC12(3)，DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1，FL2，FL3或FL4通道。
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