Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit 抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒


描述

Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit

抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒

 

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)

Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit 

抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒      

MP7508-30ML      3×10ml          1262
Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit 

抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒

MP7508-60ML 3×20ml 1862

 

产品描述

酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,ACP),是一类磷酸酯酶,在酸性条件下可以催化磷酸酯键的水解。酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中分子量从18kD到100kD不等。ACP主要分为两类,一类为抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRAP),一类为抗氟酸性磷酸酶(Fluoride resistant acid phosphatase,FRAR)。 

TRAP是一种糖基化的含金属蛋白酶,在破骨细胞(Osteoclast)和破软骨细胞(Chondroclast)中高表达,在活化的巨噬细胞和神经元中也有表达。存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的TRAP均在细胞滤泡中,并非释放到血液中。血液中TRAP绝大部分来源于破骨细胞,因此,测量血液中TRAP可以了解破骨细胞的功能状态。TRAP在细胞信号转导、细胞增殖和分化等方面起重要作用,也和活性氧产生和铁离子转运等有关。 

本抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒(Tartrate Resistant Acid Phosphatase Stain Kit, TRAP Stain Kit)以萘酚AS-BI为底物,酸性pH下被ACP水解生成磷酸和萘酚,萘酚与重氮盐偶联生成有色产物,定位于细胞胞浆中。若细胞内ACP含抗酒石酸活性,则呈阳性反应。本品可用于新鲜血涂片、细胞涂片和冰冻切片染色。

 

产品组成

组分编号 组分名称 产品货号(规格) 保存方式
MP7508-30ML MP7508-60ML
MP7508-A TRAP固定液 25ml×1 50ml×1 2-8℃避光保存
MP7508-B1 AS-BI缓冲液 0.5ml×2 0.5ml×4 -20℃避光保存
MP7508-B2 GBC染色液 0.1ml×1 0.2ml×1 2-8℃避光保存
MP7508-B3 TRAP缓冲液 9ml×1 18ml×1 RT避光保存
于正式实验前,将MP7508-B1:B2:B3按照10:1:90混合,即得到TRAP染色液,需按量现配现用。
MP7508-C 苏木素染色液 10ml×1 20ml×1 RT避光保存

 

保存与运输方法

保存:-20℃~RT保存,各组分保存详见标签,12个月稳定。

运输:冰袋运输。

 

注意事项

1) TRAP染色液易失效,请务必现配现用。

2) GBC染色液请不要置于-20℃冻存,需2-8℃避光保存。

3) 样本需新鲜,取材后请立即处理,否则会影响酶活性。

4) 对于冰冻切片染色,应尽量减少切片在室温暴露的时间。

5) 对于血液涂片,推荐皮肤穿刺血涂片,晾干后及时染色

6) 本品不建议用于石蜡切片染色。

7) 组织固定需在4℃冰箱进行,时间不要超过24h,否则酶活性会减弱或消失。

8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

操作步骤 

实验前准备材料:蒸馏水,恒温箱,载玻片,光学显微镜 

一、 血液、细胞涂片

1.1 推片:取新鲜血液或骨髓涂片置于载玻片上,推玻片与载玻片保持30°,置于血液或细胞滴液的正前方,稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前方滑动置铺满血膜为止。

1.2 自然晾干,TRAP固定液4℃固定30s~3min,多数情况1min内即可。

1.3 水洗、稍微晾干(不易过分干燥)。

1.4 切片入现配的TRAP染色液,置于37℃温箱,避光浸染45~60min,水洗。

1.5 复染:用苏木素染色液复染3~5min。

1.6 水洗、晾干、镜检。

 

二、 冰冻切片染色 

2.1 冰冻切片回温至37℃,水中浸泡1~2min。

2.2 自然晾干,TRAP固定液4℃固定1~3min

2.3 水洗、稍微晾干(不易过分干燥)。

2.4 切片入现配的TRAP染色液,置于37℃温箱,避光浸染45~60min,水洗。

2.5 复染:用苏木素染色液复染5~8min。

2.6 水洗、晾干、镜检。

 

三、 染色结果

阳性部位(酶活性部位)                             紫红色                                                  
细胞核 蓝色

 

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