Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method) 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)


描述

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method)

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

产品信息

产品名称 产品编号 规格 价格(元)  

Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method)    

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

MP7505-30ML     3×10ml  1242
MP7505-60ML 3×20ml 2082

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产品描述

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP,AKP或AP)是一类磷酸酯酶,碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化,广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。

本碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)(Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod))利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下,细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片等的ALP染色,ALP阳性反应部位呈蓝色,位于胞浆,染色结果比金属盐沉淀法相对可靠些。

产品组成

组分编号 组分名称 产品货号(规格) 保存方式             
MP7505-30ML     MP7505-60ML     
MP7505-A        ALP固定液             10ml 20ml RT避光保存
MP7505-B1 AS-BI染色液 5ml 10ml -20℃避光保存
MP7505-B2 FBB染色液 5ml 10ml 2-8℃避光保存
MP7505-C 核固红染液 10ml 20ml 2-8℃避光保存

保存与运输方法

保存:按照对应组分的要求来保存,1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

1)   血液、骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。

2)   培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。

3)   培养细胞或爬片细胞不建议采用ALP固定液,此ALP固定液适用于血液或骨髓细胞涂片的固定。

4)   为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤

一、 ALP染色液的准备

临用前,取适量的AS-BI染色液(B1)和FBB染色液(B2)按照1:1比例混合,即得到ALP染色液,现配现用。

、 涂片或切片染色

1.1    血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片放入ALP固定液固定3min(注:梯度入水的石蜡切片无需固定),水洗。

1.2    滴加新鲜配制的ALP染色液,放入湿盒,避光孵育15-20min,水洗。

1.3    入核固红染色液复染3-5min。

1.4    水洗、镜检或甘油明胶封片后镜检。

、 贴壁细胞染色

2.1 取6孔板或其他容器培养的细胞,弃培养液,PBS清洗细胞。

2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20min,PBS清洗细胞。

2.3 滴加新鲜配制的ALP染色液,放入湿盒,避光孵育15-20min,PBS清洗。

2.4 入核固红染色液复染30s~3min。

2.5    PBS清洗、镜检。

三、染色结果

阳性部位                   蓝色                          
细胞核 红色(核固红)

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货号 名称 规格
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