描述
Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method)
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Method) 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) |
MP7505-30ML | 3×10ml | 1242 |
MP7505-60ML | 3×20ml | 2082 |
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产品描述
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP,AKP或AP)是一类磷酸酯酶,碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化,广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。
本碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)(Alkaline Phosphatase Stain Solution (Coupling azo-dye Mehod))利用的是偶氮偶联法来定性检测磷酸酶活性。工作原理是在pH 9.2-9.8的碱性条件下,细胞内ALP可使AB-BI磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片等的ALP染色,ALP阳性反应部位呈蓝色,位于胞浆,染色结果比金属盐沉淀法相对可靠些。
产品组成
组分编号 | 组分名称 | 产品货号(规格) | 保存方式 | |
MP7505-30ML | MP7505-60ML | |||
MP7505-A | ALP固定液 | 10ml | 20ml | RT避光保存 |
MP7505-B1 | AS-BI染色液 | 5ml | 10ml | -20℃避光保存 |
MP7505-B2 | FBB染色液 | 5ml | 10ml | 2-8℃避光保存 |
MP7505-C | 核固红染液 | 10ml | 20ml | 2-8℃避光保存 |
保存与运输方法
保存:按照对应组分的要求来保存,1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
1) 血液、骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2) 培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。
3) 培养细胞或爬片细胞不建议采用ALP固定液,此ALP固定液适用于血液或骨髓细胞涂片的固定。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
一、 ALP染色液的准备
临用前,取适量的AS-BI染色液(B1)和FBB染色液(B2)按照1:1比例混合,即得到ALP染色液,现配现用。
二、 涂片或切片染色
1.1 血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片放入ALP固定液固定3min(注:梯度入水的石蜡切片无需固定),水洗。
1.2 滴加新鲜配制的ALP染色液,放入湿盒,避光孵育15-20min,水洗。
1.3 入核固红染色液复染3-5min。
1.4 水洗、镜检或甘油明胶封片后镜检。
三、 贴壁细胞染色
2.1 取6孔板或其他容器培养的细胞,弃培养液,PBS清洗细胞。
2.2 加入4%多聚甲醛固定10-20min,PBS清洗细胞。
2.3 滴加新鲜配制的ALP染色液,放入湿盒,避光孵育15-20min,PBS清洗。
2.4 入核固红染色液复染30s~3min。
2.5 PBS清洗、镜检。
三、染色结果
阳性部位 | 蓝色 |
细胞核 | 红色(核固红) |
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