描述
Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)
碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
|
Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method) 碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法） |
MP7504-100ML | 2×50ml | 752 |
| MP7504-200ML | 2×100ml | 1492 |
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产品描述
碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase，ALP，AKP或AP）是一类磷酸酯酶，碱性条件下能够将核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化，广泛分布于哺乳动物组织内。ALP主要存在于物质交换活跃处（细胞膜），如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。还发现于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。
本碱性磷酸酶染色液（改良钙钴法）（Alkaline Phosphatase Stain Solution (Modified Gomori’s Method)）利用的是金属沉淀法来定性检测磷酸酶活性。检测原理是以天然存在的β-甘油磷酸钠为底物，经碱性磷酸酶水解释放出磷酸，磷酸根与钙离子结合为磷酸钙沉淀，再依次被置换为磷酸钴和硫化钴，最终产物为黑色硫化钴沉淀。
产品组成
| 组分编号 | 组分名称 | 产品货号（规格） | 保存方式 | |
| MP7504-100ML | MP7504-200ML | |||
| MP7504-A | ALP染色液 | 50ml×1 | 100ml×1 | 2-8℃避光保存 |
| MP7504-B | 硝酸钴染液 | 50ml×1 | 100ml×1 | RT避光保存 |
| MP7504-C | ALP硫化液 | 1ml×2 | 1ml×3 | RT避光保存 |
| MP7504-D | ALP对照液 | 10ml×1 | 20ml×1 | 2-8℃避光保存 |
保存与运输方法
保存：2-8℃保存，6个月稳定。
运输：冰袋运输。
注意事项
1） ALP染色液、ALP硫化液容易失效，建议开封后根据小份保存，避免重复性开盖使用，影响性能。
2） ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味，操作需小心。
3） 样本需新鲜，取材后请立即处理，否则会影响酶活性。
4） 组织固定需在4℃进行，时间不要超过24h，否则酶活性会减弱或消失。
5） 组织在石蜡包埋时，温度不要超过56℃。应使用熔点为52-54℃的石蜡进行浸染，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。
6） 石蜡切片脱蜡所用的二甲苯需用AR级以上的，不纯的二甲苯会分解黑色沉淀。
7） 冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
8） 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤
实验前准备材料：蒸馏水，温箱或水浴锅
一、 石蜡切片染色
1.1 石蜡切片脱蜡至蒸馏水；
1.2 切片入ALP染色液，37℃孵育2~12h；
【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】
1.3 流动水清洗2min，入蒸馏水；
1.4 入硝酸钴染液，37℃孵育5min；
1.5 流水洗5min，入蒸馏水；
1.6 准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；
1.7 流水洗10min，入蒸馏水；
1.8 （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；
1.9 石蜡切片常规脱水、透明、中性树胶封片。
二、 冰冻切片染色
2.1 冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内，4℃固定2-5min；
2.2 切片入ALP染色液，37℃孵育5-15min；
【注意：若需要做阴性对照，可选一切片入ALP对照液，该对照液不含酶的反应底物。】
2.3 流水洗2min，入蒸馏水；
2.4 入硝酸钴染液，37℃孵育5min；
2.5 流水洗5min，入蒸馏水；
2.6 准备ALP硫化工作液：取ALP硫化液用蒸馏水或去离子水稀释50倍，混匀即得到硫化工作液，现配现用。切片放入硫化工作液，孵育1-2min；
2.7 流水洗10min，入蒸馏水；
2.8 （可选）核固红复染细胞核，用蒸馏水洗；
2.9 冰冻切片用甘油明胶封片剂封片。
三、 染色结果
| 阳性部位 | 黑色硫化钴沉淀 |
| 细胞核 | 红色（核固红） |
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