FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针


描述

FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针

产品标签

FeRhoNox-1;FerroOrange;Labile ferrous ion 不稳定铁(II)离子;Fe2+荧光探针;Ferroptosis 铁死亡;C11 BODIPY 581/591 脂质过氧化探针;

产品信息

产品名称

产品编号      规格 价格(元) 

FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针  

MX4558-50UG 50μg

1300

FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针 MX4558-100UG 2×50μg

2500

FeRhoNox-1 (Fe2+ indicator) 亚铁离子荧光探针 MX4558-250UG 5×50μg

6150

产品描述

FeRhoNox-1,也称为RhoNox-1,是一种活跃的荧光探针,特异性检测不稳定的铁(II)离子(Fe2+)。一旦与Fe2+反应后,不可逆的生成一种橙色(红色)荧光产物(Absmax=540nm,FLmax=575nm,图1.FeRhoNox-1的光谱特征)。生理浓度下的铁(III)离子(Fe3+)或其它除铁离子以外的二价金属离子都不会使其荧光增强(见图2FeRhoNox-1的选择性).FeRhoNox-1的反应特异性)。FeRhoNox-1具细胞膜渗透性和高选择性,适用于活细胞内Fe2+的检测,倾向定位在高尔基体。

图1. FeRhoNox-1的光谱特征。FeRhoNox-1与Fe2+反应后吸收和发射光谱(上)。FeRhoNox-1在37℃,与Fe2+反应1h后,荧光明显增强。最大荧光峰约在575nm。

图2. FeRhoNox-1的选择性。FeRhoNox-1仅与Fe2+反应。

保存与运输方法

保存:-20℃避光干燥保存,至少1年有效。

运输:冰袋运输。

注意事项

  1. FeRhoNox-1倾向定位在高尔基体,但也可能检测细胞质池内的Fe2+,目前针对这一点未做明确评估。
  2. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
  3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

1. 需要自行准备的材料

1.1细胞培养级或超纯DMSO(比如:MS4601A-100ML)【强烈建议将高纯的DMSO分装成单次用量保存在极低温冷冻室内,比如-80℃,避免吸潮。降解的DMSO可能会增加FeRhoNox-1的背景信号】

1.2合适的清洗和观察缓冲液(比如:PBS, pH 7.4;HBSS;等)。不要含酚红。

2. 探针准备

2.1从冰箱取出FeRhoNox-1,置于室温回温至少30min,将其置于微量离心机内低速离心。将瓶内的粉末离心到管底后,再开盖。

2.2往一管FeRhoNox-1(50μg)内加入109μl高质量DMSO,用枪反复吹吸5次或以上,使其完全溶解即得到1mMFeRhoNox-1储存液。建议单次用完储存液,若实在用不完,请根据单次用量分装,置于-80℃避光保存。用中性缓冲液来稀释储存液。

2.3于正式实验前,用HBSS或其他中性缓冲液来稀释1mMFeRhoNox-1储存液到所需工作浓度(比如:5μM),工作液需现配现用,尽快用完。【注意:酸性溶液会氧化FeRhoNox-1,严重影响探针的效率】。

3. 染色步骤

4. 荧光检测

对于荧光激发:通用的绿色激发滤片比如Cy3或四甲基罗丹明(TMR)检测用的滤片。

对于激光激发:532nm或543nm激光器比较适合。发射波长为570nm左右。

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货号

名称    规格    

 MX5211-1MG 

C11 BODIPY 581/591 脂质过氧化荧光探针 1mg

 MX4558-50UG

FeRhoNox-1 (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针 50μg
MX4559-24UG FerroOrange (Fe2+indicator) 亚铁离子荧光探针

24μg

MX5401-1MG MitoPerOx Mitochondrial Lipid Peroxidation Indicator线 粒体脂质过氧化探针

1mg

MX5402-1MG BODIPY 558/568 C12脂质转运荧光探针

1mg

附录F eRhoNox-1的染色示例

I. HepG2细胞

图3. FeRhoNox-1在HepG2活细胞内的成像检测。①-Fe(II):细胞未添加亚铁离子(100μM硫酸亚铁铵);②+Fe(II):细胞加载亚铁离子;③+Fe(II)+Bpy:细胞加载亚铁离子,之后用加入铁离子螯合剂Bpy。图②荧光增强,而图③荧光降低。此结果与FeRhoNox-1特异性检测Fe(II)的特征一致。