Hoechst 33342,也称为Bisbenzimide H 33342(双苯酰亚胺H 33342),是一种A:T特异性的DNA小沟配基

Hoechst 33342 活细胞细胞核探针;Hoechst 33258;DAPI;PI 碘化丙啶;7-AAD;CAS:23491-52-3;

产品信息

产品名称 产品编号 规格 CAS NO.
Hoechst 33342 细胞核探针 MX4203-10MG 10mg 23491-52-3
Hoechst 33342 细胞核探针 MX4203-100MG 100mg 23491-52-3
Hoechst 33342 Stain, Ready-to use 即用型染色液 MX4204-10ML 10ml 23491-52-3
Hoechst 33342 Stain, Ready-to use 即用型染色液 MX4204-50ML 50ml 23491-52-3

产品描述

Hoechst 33342,也称为Bisbenzimide H 33342(双苯酰亚胺H 33342),是一种A:T特异性的DNA小沟配基,具有细胞膜渗透性,广泛用于细胞核DNA检测的荧光染料。与DNA结合后产生非常强烈的蓝色荧光,最大激发波长在350nm左右,最大发射波长在461nm左右。与其它Hoechst染料不同,Hoechst 33342由于多一个乙基,具有更强的亲脂性。研究发现可替代几种著名的DNA嵌入剂。

Hoechst 33342可通过流式细胞分选(FACS)进行基于DNA内容物的活细胞分选,可用来监测活细胞的染色质分布,用来检测BrdU插入细胞情况,通过荧光显微镜进行固定细胞观察,和研究凋亡早期和细胞周期分布情况。除了在荧光方面的功能,Hoechst 33342在细胞类型区分方面呈现多样化效应。可用来诱导细胞分化,可逆结合弗兰德红白血病细胞,抑制Topo I(拓扑异构酶I)活性,诱导HL-60细胞的凋亡,以及调控连接肌质网细胞的Ca2+外流并影响细胞分化。

本品以粉末形式提供,溶于水,溶解度可达20mg/ml。用于细胞核染色,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。

产品特性

1)CAS NO:23491-52-3

2)英文同义名:2′-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5′-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride; bisBenzimide H 33342 trihydrochloride; HOE 33342; Hoechst 33342 bisBenzimide;

3)中文同义名:2′-(4-乙基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5′-二-1H-苯并咪唑三盐酸盐;双苯酰亚胺H 33342三盐酸盐;Hoechst 33342双苯酰亚胺;

4)分子式:C27H28N6O · 3HCl · xH2O

5)分子量:561.93 (anhydrous basis)

6) 纯度:≥95%

7)外观:黄绿色粉末

8)溶解性:溶于水(20 mg/ml)

9)Ex/Em:346/460 nm;350/461 nm(Hoechst 33342-DNA);

10)化学结构:

保存与运输方法

保存:-20°C避光干燥保存,3年有效。

运输:冰袋运输。

储存液配制

用双蒸水溶解,溶解度高达20mg/ml,根据实际情况配制所需浓度的储存液如5mg/ml。储存液2-8ºC避光保存,至少1个月有效。【注意】:本品用磷酸盐缓冲液溶解会出现沉淀。

使用方法

1、工作液配制

用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作浓度(0.5-10μg/ml)。

2、固定的细胞或组织染色

对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。Hoechst 33342染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行Hoechst 33342染色。

2.1 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5min。

2.2 吸除Hoechst 33342染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5min。

2.3 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。

3、活的细胞或组织染色

3.1 细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板,一个孔通常需加入1ml染色液;对于96孔板,一个孔通常需加入100μl染色液。

3.2 在37℃培养细胞10~20min。

3.3 用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。

3.4 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=350/461nm。

注意事项

1)Hoechst 33342对人体有一定刺激性,请注意适当防护。

2)荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。

3)为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液(Fluoromount-GTM抗荧光淬灭封片剂(水溶性),货号:MM1401-5ML)。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。