描述
Improved General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100× Stock Solution）
改进型广谱磷酸酶抑制剂混合物（100×储液）
产品标签
AEBSF；Pepstatin A；Roche cOmplete™ Protease Inhibitor Cocktail 蛋白酶抑制剂混合物；Pierce Halt Protease Inhibitor Cocktail；RochePhosSTOP™ 磷酸酶抑制剂混合物； PMSF；
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Improved General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100× Stock Solution）
改进型广谱磷酸酶抑制剂混合物（100×储液） |
MP1613-1Pack | 1包 | 450 |
| MP1613-10Pack | 10×1包 | 3200 |
温馨提示：见我司（金畔生物）整理的蛋白酶抑制剂cocktail产品专题（含 RochecOmplete™）。
温馨提示：见我司（金畔生物）整理的磷酸酶抑制剂cocktail产品专题（含 RochePhosSTOP™）。
温馨提示：见我司（金畔生物）整理的单一蛋白酶/磷酸酶抑制剂产品专题。
产品包装
| 组分编号 | 组分名称 |
产品编号（规格） |
|
| MP1613-1Pack（1包） | MP1613-10Pack（10包） | ||
| MP1613-A | 混合物A液（100×水溶液） | 1ml | 10×1ml |
| MP1613-B | 混合物B液（100×DMSO溶液） | 1ml | 10×1ml |
产品描述
细胞内蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、分化和凋亡等重要生理活动的调控开关，这两种作用主要通过蛋白激酶和磷酸酶的相互协调来实现。体外研究中，由于组织或者细胞经裂解会释放出大量的酶原，这些酶原会被激活从而开始消化随之释放的待研究蛋白，不仅影响对蛋白真实水平的了解，甚至由于某些蛋白含量很低，再经进一步降解，无法检测到，干扰对调控机制的正确研究。为此，体外研究，最大限度还原蛋白在细胞内的原始状态极其重要，可通过蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的组合使用来达此目的。
本品A，B两管的形式提供，A管是多种传统磷酸酶抑制剂的混合物，包含氟化钠，正钒酸钠，咪唑，钼酸钠，酒石酸钠等成分；B管是近年发现的一批天然代谢产物，具有更特别的磷酸酶抑制效果，也进一步增加了磷酸化保护范围。本品广谱抑制非特异性的酸性和碱性磷酸酶，以及特异性的酪氨酸磷酸酶，丝氨酸和苏氨酸蛋白磷酸酶等。
本品以100×储存液的形式提供，可用来保护来源于原代细胞、哺乳动物细胞、动植物、细菌、酵母等组织或细胞等裂解物中的多种磷酸化蛋白维持本来状态，适用于蛋白纯化，蛋白免疫印迹（Western Blot），免疫（共）沉淀（IP/Co-IP），蛋白下拉（Pull-down assay），免疫荧光（IF），免疫组化（IHC），以及激酶研究等多种实验。
产品成分
| 抑制剂名称 | 抑制靶点 |
| Imidazole 咪唑 | 蛋白组氨酸磷酸酶（protein histidine phosphatase, PHP） |
| Sodium Fluoride 氟化钠 | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶（protein serine/threonine phosphatase,PSP），酸性磷酸酶（acid phosphatase） |
| Sodium Orthovanadate
正钒酸钠 |
蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatase, PTP），碱性磷酸酶（alkaline phosphatase） |
| Sodium Molybdate 钼酸钠 | 酸性磷酸酶（acid phosphatase） |
| Sodium Tartrate 酒石酸钠 | 酸性磷酸酶（acid phosphatase） |
| (-)-p-Bromotetramisole Oxalate
(-)-对溴四咪唑草酸盐 |
碱性磷酸酶（alkaline phosphatase） |
| Cantharidin 斑蝥素 | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶（protein serine/threonine phosphatase,PSP） |
| Microcystin-LR | 蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸酶PP1/PP2A （protein Ser/Thr phosphatases PP1 and PP2A） |
保存与运输方法
保存：-20℃冻存，1 年稳定；4℃冻存，2 个月稳定。
运输：冰袋运输。
使用方法
1） 使用前室温平衡直至完全溶解【注意：混合物 B 液为溶于 DMSO 的溶液，融化很慢，建议放到 25℃ 水浴锅内促进融化】 ，低速震荡以保证各成分均匀。
2） 按照 1:100 的比例（体积比）加入样品溶液（比如细胞或组织裂解液）中。分步加入 A、B 液：先加 A 液，混匀；再加 B 液，再一次混匀。
注意事项
1）DTT、EDTA和EGTA对正钒酸钠活性的发挥会有影响。
2）本品与常用的去垢剂如1% SDS，Triton，和NP-40兼容。
3）本品具广谱磷酸酶抑制活性，不具有蛋白酶抑制活性。可配合广谱型蛋白酶抑制剂混合物（100×储液）（货号：MP1610-1ML）一起使用以实现蛋白的全面保护。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
常见问题
1. 混合物B液需要长时间融化？
因混合物B液是溶于DMSO。DMSO融化很慢，尤其是在低温环境下。建议25℃水浴促进融化。第一次使用将B液根据单次用量分装，比如10×100 µl，一方面能延长保存周期，一方面也能缩短融化时间。
2. 为什么磷酸化蛋白和非磷酸化蛋白的Western条带都非常弱？
此种情况需加入广谱蛋白酶抑制剂混合物（General Protease Inhibitor Cocktail）（货号：MP1610-1ML）以保护总蛋白不被降解。
3. 贵司提供两种磷酸酶抑制剂混合物，广谱磷酸酶抑制剂混合物（货号：MP1612-1ML）和改进型广谱磷酸酶抑制剂混合物（货号：MP1613-1Pack），两者有什么差别？
两者的差别主要在于所含的磷酸酶抑制剂组分不同，后者使用近些年发现的一批天然代谢产物，具有更特别的磷酸酶抑制广度。用户根据自身研究的磷酸化蛋白和细胞或组织特点来选择，大部分应用，两者可相互替换。
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MP1610-1ML | 1ml | 380 |
| General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×Stock Solution)
广谱型磷酸酶抑制剂混合物（100×储液） |
MP1612-1ML | 1ml | 380 |
| Improved General Phosphatase Inhibitor Cocktail (100× Stock Solution）
改进型广谱磷酸酶抑制剂混合物（100×储液） |
MP1613-1Pack | 1包 | 450 |
常见蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂：
| 名称 | 货号 | 抑制类型 | 作用位点 | 溶解性 | 建议工作浓度 |
| PMSF | MP1601-1G | 可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 甲醇、异丙醇 | 0.1～1 mM |
| AEBSF HCl | MP1602-50MG | 不可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 水 | 0.1～1 mM |
| Aprotinin | MP1603-5MG | 可逆 | 丝氨酸蛋白酶 | 水 | 100～200 nM |
| Leupeptin | MP1604-5MG | 可逆 | 丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶 | 水 | 10～100 μM |
| Pepstatin | MP1605-5MG | 可逆 | 天冬氨酸蛋白酶 | 甲醇 | 1～20 μM |
| E-64 | MP1606-5MG | 不可逆 | 半胱氨酸蛋白酶 | 乙醇：水（1:1） | 1～20 μM |
| EDTA | MS5503-500G | 可逆 | 金属蛋白酶 | 水 | 2～10 mM |
| Bestatin | MP1607-10MG | 可逆 | 氨肽酶 | 甲醇 | 1～10 μM |
| Sodium Orthovanadate | MP1608-10G | 不可逆 | 酪氨酸和碱性磷酸酶 | 水 | 1～100 mM |
| Sodium Fluoride | MP1609-50G | 不可逆 | 丝/苏氨酸和酸性磷酸酶 | 水 | 1～20 mM |