Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶；Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶；Lyticase；Glusulase；Protoplast 原生质体；Spheroplast 原生质球；

产品信息

产品名称	产品编号	规格
Zymolyase-20T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶，来自藤黄节杆菌	MF0212-200MG	200mg
	MF0212-1G	1g
	MF0212-10G	10g

产品描述

Zymolyase®-20T是藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus）深层发酵产生并通过硫酸铵沉淀纯化获得的一种新型酶制品，具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性，产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶（β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase），该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物，释放出特异性的昆布五糖（也是最主要和最小的水解产物单元）。Zymolyase®-20T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。

本品以冻干粉形式提供，酶比活力为20,000 units/g，易溶于水，适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。

产品规格

来源		藤黄节杆菌（Arthrobacter luteus）
外观		冻干粉
纯化方式		硫酸铵沉淀
比活力		20,000 units/g
必需酶		β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶
含有的其他活性酶*	β-1,3-葡聚糖酶	约1.5 x 106units/g
	蛋白酶	约1.0 x 104units/g
	甘露聚糖酶	约1.0 x 106units/g
污染酶	淀粉酶，木聚糖酶，磷酸酶	微量
最佳pH和温度		pH7.5, 35°C（裂解活酵母细胞）；pH6.5, 45°C（水解酵母葡聚糖）
稳定pH范围		pH 5-10
热稳定性		60°C，5min酶活性完全损失
激活剂		巯基化合物比如半胱氨酸，β-巯基乙醇或DTT
特异性（溶解范围）		Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis, Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc.
[*]：参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。

活力测定

1. 单位定义：在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位（unit）。

2. 反应体系

底物	3ml 啤酒酵母细胞悬液（2mg干重/ml）
缓冲溶液	5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5
酶溶液	1ml Zymolyase®-20T Solution: 0.05-0.1mg/ml
去离子水	1ml
总体积	10ml

3. 反应程序

25°C孵育2h后轻轻混匀体系，于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。

4. 计算酶活力

A800降低百分比=（对照组A800-反应组A800）×100/对照组起始A800

当A800吸光度减少60%，相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解，意味着1 unit Zymolyase®-20T能裂解3mg干重啤酒酵母。

保存与运输方法

保存：2-8℃干燥保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

注意事项

1. Zymolyase®-20T冻干粉置于30℃，3个月酶活力损失约70%。

2. 当需要制备无菌酶溶液，可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

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常见问题（Frequently asked questions）：

产品如何保存？

答复：本品以冻干粉形式提供，收到产品需2-8℃干燥保存。本品置于30℃，3个月酶活力损失约70%。本品溶于缓冲液配制成储存液后，短期置于2-8℃保存，约2周稳定。长期请置于-20℃保存，约数月稳定。

冻干粉如何溶解？

答复：本品易溶于水。建议用1/15M phosphate buffer（pH 7.5）溶解，或用自己实验体系相关缓冲液来溶解。储存液的制备方法比较多，主要根据自身的实验体系，或参考文献来操作。短期置于2-8℃保存，约2周稳定。长期请置于-20℃保存，约数月稳定。

如何制备无菌酶溶液？

答复：若需要制备无菌酶溶液，请用除硝酸纤维素膜之外的0.22µm孔径的滤膜过滤除菌。

酶的比活力是多少？

答复：Zymolyase-20T指的是酶的比活力约20，000 units/g (20 Ku/mg)，具体批次酶的比活力是有变化的，详细请见产品标签或质检报告。

Zymolyase适用于哪些菌株类型？

答复：该酶的裂解谱（lytic spectrum）包含以下菌属：Ashbya（阿舒囊霉属）, Candida（假丝酵母菌属）, Debaryomyces（德巴利（氏）酵母属）, Eremothecium(假囊酵母属), Endomyces(内孢霉), Hansenula(汉逊氏酵母), Hanseniaspora(孢汉逊酵母属), Kloeckera(克勒克酵母属), kluyveromyces（克鲁维酵母属）, Lipomyces(油脂酵母属), Metschnikowia(梅奇酵母属), Pichia(毕赤酵母属), Pullularia(芽霉菌属), Torulopsis(球拟酵母菌), Saccharomyces(酵母属), Saccharomycopsis(复膜酵母菌属), Saccharomycodes(类酵母属), Schwanniomyces(许旺酵母菌属)，等等。其他未罗列在内的菌属请查阅文献或和我司联系是否有相关应用数据。

Zymolyase适用于丝状真菌吗？

答复：该酶主要用于酵母细胞壁的裂解，对于丝状真菌，虽然与酵母细胞壁在结构上有很多相似，但裂解效果因菌株类型有差异。建议用复合酶的形式来特异裂解丝状真菌，或选用我司（金畔生物）提供的真菌溶壁酶（Cat#:MX7356）。

酶的工作浓度一般是多少？

不同的酵母菌株对酶的敏感性会有差异，请参阅文献或根据实际的裂解经验来设定合适的工作浓度。操作方法可参考下方流程。