描述
Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus
酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌
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产品标签
Zymolyase® 酵母细胞壁溶解酶;Yeast lytic enzyme 酵母裂解酶;Lyticase;Glusulase;Protoplast 原生质体;Spheroplast 原生质球;
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Zymolyase-100T from Arthrobacter luteus 酵母溶壁酶,来自藤黄节杆菌 | MF0211-500MG | 500mg | 13880 |
MF0211-5G | 5g | 89280 |
产品描述
Zymolyase®-100T是藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus)深层发酵产生并通过亲和色谱法部分纯化获得的一种新型酶制品,具有强烈的酵母菌活细胞壁溶解活性,产生各种酵母细胞株的原生质体或原生质球。本酶制品决定酵母细胞壁溶解活性的必需酶是β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶(β-1,3-glucan laminaripentaohydrolase),该酶水解β-1,3-连接的线性化葡萄糖聚合物,释放出特异性的昆布五糖(也是最主要和最小的水解产物单元)。Zymolyase®-100T的溶解范围根据酵母类型、酵母生长周期或培养条件有所变化。
本品以冻干粉形式提供,酶比活力为100,000 units/g,适用于原生质体/原生质球制备、酵母细胞融合、酵母细胞转化和酵母遗传学研究。
产品规格
来源 | 藤黄节杆菌(Arthrobacter luteus) | |
外观 | 冻干粉 | |
纯化方式 | 亲和色谱纯化 | |
比活力 | 100,000 units/g | |
必需酶 | β-1,3-葡聚糖昆布五糖水解酶 | |
含有的其他活性酶* | β-1,3-葡聚糖酶 | 约1.0 x 107units/g |
蛋白酶 | 约1.7 x 104units/g | |
甘露聚糖酶 | 约6.0 x 104units/g | |
污染酶 | 淀粉酶,木聚糖酶,磷酸酶 | 未检测到 |
最佳pH和温度 | pH7.5, 35°C(裂解活酵母细胞);pH6.5, 45°C(水解酵母葡聚糖) | |
稳定pH范围 | pH 5-10 | |
热稳定性 | 60°C,5min酶活性完全损失 | |
激活剂 | 巯基化合物比如半胱氨酸,β-巯基乙醇或DTT | |
特异性(溶解范围) | Ashbya, Candida, Debaryomyces, Eremothecium, Endomyces, Hansenula,
Hanseniaspora, Kloeckera, kluyveromyces, Lipomyces, Metschnikowia, Pichia, Pullularia, Torulopsis,Saccharomyces, Saccharomycopsis, Saccharomycodes, Schwanniomyces, etc. |
|
[*]:参考文献Kitamura, K., Kaneko, T., Yamamoto, Y., Appl. Microbiol., 18, 57 (1972)进行各种酶活力定义。 |
活力测定
1. 单位定义:在以下反应条件的反应体系中吸光值A800下降30%定义为一个酶活力单位(unit)。
2. 反应体系
底物 | 3ml 啤酒酵母细胞悬液(2mg干重/ml) |
缓冲溶液 | 5ml 1/15M磷酸盐缓冲液, pH 7.5 |
酶溶液 | 1ml Zymolyase®-100T Solution: 0.012-0.024mg/ml |
去离子水 | 1ml |
总体积 | 10ml |
3. 反应程序
25°C孵育2h后轻轻混匀体系,于800nm处测定吸光值。以1ml去离子水替代酶溶液的混合液作为对照。
4. 计算酶活力
A800降低百分比=(对照组A800-反应组A800)×100/对照组起始A800
当A800吸光度减少60%,相当于2 units。此时反应体系中啤酒酵母细胞完全裂解,意味着1 unit Zymolyase®-100T能裂解3mg干重啤酒酵母。
保存与运输方法
保存:2-8℃干燥保存,至少1年有效。
运输:冰袋运输。
注意事项
1. Zymolyase®-100T冻干粉置于30℃,3个月酶活力损失约90%。
2. 当需要制备无菌酶溶液,可用除硝酸纤维素膜之外的滤膜过滤除菌。
3. Zymolyase®-100T的溶解性很差,因此以悬浮液的形式使用。如果使用浓度高于0.5mg/ml的无菌酶溶液,用含50mg/ml葡萄糖的缓冲液(pH7.5)配置20mg/ml Zymolyase®-100T溶液,去除不容物质,用滤膜过滤除菌,之后用合适的缓冲液稀释到需要的浓度。具体的工作浓度可参考文献资料,自身实验目的,反应体系等来调整。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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