人ES/iPS细胞 无饲养层无血清培养基

StemSure^® hPSC培养基△

　　本产品是一款可在无饲养层条件下维持培养人多能干细胞（人ES细胞和人iPS细胞）的无血清培养基。由于原材料中不含动物来源成分，以及BSA和HSA等白蛋白，所以无批间差异，可实现稳定培养。但本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。

◆ 特点

●　可在无饲养层条件下培养人ES细胞以及人iPS细胞的无血清培养基

●　每批次都使用人iPS细胞201B7株进行质量检测

●　不使用动物来源成分

●　非药用毒物及剧毒物，易于处理和储存。

●　不含白蛋白的低蛋白培养基

●　可与Matrigel^® 、iMatrix-511、Vitronectin等多种涂层剂联用

●　可与Accutase，TrypLE Select等解离液联用

●　传代时可通过添加Y-27632实现使用单细胞传代

◆测试项目

●　细胞增殖测试（使用人iPS细胞201B7株）

●　碱性磷酸酶染色（使用人iPS细胞201B7株）

●　无菌测试

●　pH

●　渗透压

●　内毒素

●　支原体测试

◆使用注意事项

　　本产品不含bFGF（碱性成纤维细胞生长因子）。

　　本产品需冷冻（-20℃）储存。溶解后不可再次冷冻，建议在2~10℃条件下进行储存，并在1周内使用完毕。

◆人iPS细胞201B7株的培养

将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人iPS细胞201B7株移植至StemSure^® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。

细胞形态

在StemSure^® hPSC培养基Δ中培养的人iPS细胞的细胞形态与A公司培养基培养的几乎相同，也没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。

细胞群倍加数

移植到StemSure^® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，StemSure^® hPSC培养基Δ培养的细胞增殖情况更为良好。

<培养基组成>

StemSure^® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF

<细胞接种数>

1×10⁵ cells/well （使用6孔板）

未分化性能维持的确认

　　使用StemSure^® hPSC培养基进行5次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。

　　※BC2LCN是一种对存在于人ES细胞/人iPS细胞膜表面的糖链具有高亲和性的重组凝集素。

＜数据提供　独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师＞

◆人ES细胞WA01株的培养

将使用A公司培养基（含BSA、无饲养层用）培养的人ES细胞WA01株移至StemSure® hPSC培养基Δ，进行传代培养。以下为传代培养时的细胞形态、细胞群倍加数和未分化性能维持检测的结果。

细胞形态

使用A公司培养基进行培养时，在2次传代以后开始出现趋向分化形态的细胞。但使用StemSure^® hPSC培养基Δ培养的人ES细胞没有观察到趋向分化的形态，可实现稳定培养。

细胞群倍加数

移植到StemSure^® hPSC培养基Δ后，立即进行第1~5次传代。结果显示，与A公司培养基相比，细胞的增殖能力没有差异。

<培养基组成>

StemSure^® hPSC培养基Δ + 35 ng/mL bFGF

<细胞接种数>

1×10⁵ cells/well （使用6孔板）

未分化维持的确认

使用StemSure^® hPSC培养基Δ进行6次传代维持培养，确认到全部未分化标志物（Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN）的表达。

＜数据提供　独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工程研究中心 小沼 泰子 老师、伊藤 弓弦 老师＞

◆染色体核型分析

核型分析使用StemSure^® hPSC培养基Δ进行27次传代培养的人iPS细胞，确认是否存在染色体异常。

＜数据提供　独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师＞

◆人iPS细胞201B7的三胚层分化

使用StemSure^®系列的培养基驯化培养了使用StemSure^® hPSC培养基Δ培养的人iPS细胞201B7株。胚状体形成后，通过检测βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP的表达确认三胚层分化。

<培养基组成>

StemSure^® D-MEM + StemSure^® Serum

Replacement + 2 mmol/l L-Glutamine +

0.1 mmol/l StemSure^® 2-Mercaptoetanol + 1 

x Non-essential Amino Acids Solution 

◆产品列表

产品编号	产品名称	产品规格
197-17571	StemSure(R) hPSC Medium Δ	100 mL
193-17573		100 mL × 4

碱性成纤维细胞生长因子，Y-27632

产品编号	产品名称	产品规格
060-05383	Fibroblast growth Factor (basic) (FGF-basic/bFGF/FGF2), Human, recombinant, Animal-derived-free(154aa) 成纤维细胞生长因子（碱性），人，重组，无动物衍生物	1 mg
064-05381		50 μg
068-05384		100 μg
030-24021	CultureSure™ Y-27632  CultureSure™ Y-27632（选择性ROCK抑制剂）	1 mg
036-24023		5 mg
034-24024		25 mg
030-24026		100 mg
259-00613	Y-27632, MF 选择性强效ROCK抑制剂	5 mg
257-00614		25 mg
035-24593	CultureSure™ 10mmol/L Y-27632 Solution, Animal-derived-free  CultureSure™ 10 mmol/l Y-27632溶液，无动物源	1 mL
039-24591		300 μL

StemSure^® 系列

产品编号	产品名称	产品规格
197-16275	StemSure(R) D-MEM(High glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate StemSure D-MEM（高糖）含酚红和丙酮酸钠	500 mL
191-18375	StemSure(R) Serum Replacement (SSR) Stemsure®血清替代品	500 mL
198-15781	StemSureR 10mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution (×100) StemSure 10 mmol/L 2-巯基乙醇	100 mL
195-15791	StemSure(R) 50mmol/L Monothioglycerol Solution(×100) StemSure 50 mmol/L 硫代甘油	100 mL
190-15805	StemSure(R) 0.1w/v% gelatin Solution StemSure 0.1w/v% 明胶溶液	500 mL
199-16051	StemSureR LIF, Mouse, recombinant, Solution     StemSureR 白细胞抑制因子溶液，小鼠，重组	1000000 units
195-16031	StemSure(R) Freezing Medium     StemSure 细胞冻存液	100 mL