ISOGEN II RNA 抽提试剂
ISOGEN II
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- 参考文献
ISOGEN II RNA抽提试剂
ISOGEN II
从动物组织和培养细胞中高效分离纯化含有小 RNA 的总 RNA
◆原理
ISOGEN II 是从动物组织和培养细胞中总 RNA 和小 RNA 的抽提试剂。本品是含有苯酚和胍的均相液体，根据与细胞成分的相互作用，能单一地分离 RNA 。
使用旧产品（ISOGEN 和 ISOGEN-LS）需要添加氯仿，要进行液相分离，而本产品则无需此步骤。在样品中加入 ISOGEN II 溶解或是均质化之后，再添加水，因为 DNA、蛋白质、多糖类等会形成不溶性沉淀，进行离心分离后可以去除。用乙醇沉淀并洗涤、溶解得到上清之后，能分离出高纯度的 RNA 。
◆优点・特色
● 不需使用氯仿分离 RNA
● 比起旧产品（ ISOGEN 等），小RNA 的抽提效率更高
● 可以把大 RNA（>200 bases）和小 RNA（<200 bases）分离（同时提供不分离的方案）
● DNA 污染少，抽提的 RNA 可以直接用于 RT-PCR 和 RT-qPCR 上
● 约 1 h 可完成 RNA 的抽提
内容和保存条件
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产品名称 |
构成 |
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ISOGEN II |
ISOGEN II |
100 mL |
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使用手册 |
1本 |
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冷藏保存
请在购买日起６个月内使用
本品可在室温下运输。产品到达后，在２~１０℃条件下保存即可正常使用
产品安全数据图表（MSDS）
ISOGEN II MSDS
使用手册
ISOGEN II 手册
◆案例・应用
操作流程
◆使用例子
Data 1 抽提得到的 RNA 电泳
根据 ISOGEN 和 ISOGEN II 的方案抽提 RNA，进行电泳
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M：RNA Ladder (Code No.311-06261） Lane1：ISOGEN 抽提总 RNA（2 μg） Lane2：ISOGEN II 抽提总 RNA（2 μg） Lane3：ISOGEN II 抽提高分子 RNA（2 μg） Lane4：ISOGEN II 抽提 小RNA（0.2 μg） 1.2% Agarose S（甲醛变性）EtBr 染色 |
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Lane1：ISOGEN 抽提总 RNA（5 μg） Lane2：ISOGEN II 抽提总 RNA（5 μg） Lane3：ISOGEN II 抽提高分子 RNA（5 μg） Lane4：ISOGEN II 抽提小 RNA（0.5 μg） 12% 聚丙烯酰胺（Urea 变性）EtBr 染色 |
ISOGEN II 能抽提和 ISOGEN 同等的总 RNA
ISOGEN II 能对 200 base 以上的高分子 RNA 和 10~200 base 的小 RNA 进行分离
Data 2 ISOGEN 和 ISOGEN II 抽提的总 RNA 用“3D-Gene”Human miRNA Oligo chip（东来株式会社）分析。
ISOGEN II 比 ISOGEN 能更完整地抽提 miRNA
Data 3 RT-PCR
用 ISOGEN 和 ISOGEN II 从 HeLa 细胞中提取出 RNA 并定性，再用 PT-PCR 检测出 β-Actin 基因。同时进行没有经过 RT 反应的对照实验。
1：模板RNA量 500 ng
2：模板RNA量 100 ng
3：模板RNA量 20 mg
M：Gene Ladder 100
实验证明以ISOGEN II抽提的RNA与以ISOGEN抽提的RNA相比，DNA残留更少。
Data 4 RNA 提取量的参考值
分别用 “大 RNA 的提取”和“总 RNA 的提取”方案得到的 RNA 的提取量的参考值如下：
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试剂 |
大 RNA 的提取 |
总 RNA 的提取 |
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组织 |
肝脏 |
5~7 g RNA/mg tissue |
6~8 μg RNA/mg tissue |
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肾脏、脾脏 |
3~4 g RNA/mg tissue |
3~4 μg RNA/mg tissue |
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骨骼肌、脑、肺 |
0.5~1.5 g RNA/mg tissue |
0.5~1.5 μg RNA/mg tissue |
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胎盘 |
1~3 g RNA/mg tissue |
1~3 μg RNA/mg tissue |
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培养细胞 |
上皮细胞 |
5~8 g RNA/108 cells |
5~10 μg RNA/106 cells |
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成纤维细胞 |
3~5 g RNA/108 cells |
4~6 μg RNA/106 cells |
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◆注意事项
● 本品是实验研究用的试剂，不能作为医药品或其他目的使用。另外，如果您对试剂的基本的知识不了解。请不要使用。
● 因为 ISOGEN II 是医药用外有害物质（苯酚制剂），所以请小心操作。
● 使用时请穿着适当的防护设备（手套、眼镜等）。
● 请不要吸入蒸汽，进行充分的通风。
● 如果接触皮肤或眼睛，请用大量的水冲洗至少15分钟，并前往医院就诊。
● 本品的操作请按照手册记载的内容进行
● 对于和手册记载内容不同的操作带来的事故，日本基因不负任何责任。
参考文献
| 1. |
Chomczynski, P. Reagents and methods for isolation of purified RNA, US and International Patents Pending. |
| 2. |
Chomczynski, P. and Sacchi, N:Single step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol- chloroformextraction”, Anal. Biochem., 162, 156-159（1987） |
| 3. |
Chomczynski, P.:A reagent for the single-step simultaneous isolation of RNA, DNA and proteins from cell and tissue samples”, Biotechniques, 15, 532-537(1993) |
| 4. |
Wilfinger, W., Mackey, K. and Chomczynski, P.:Effect of pH and ionic strength on thespectrophotometric assessment of nucleic acid purity”, Biotechniques, 22, 474-481(1997) |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 311-07361 | ISOGEN Ⅱ 总RNA及小RNA提取试剂 |
100 mL | 医药用外有害物质 | – |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
| 315-02504 | ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂 | 10 mL | – | RNA抽提用试剂 医药用外有害物质 |
| 317-02503 | ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂 | 50 mL | – | RNA抽提用试剂 医药用外有害物质 |
| 311-02501 | ISOGEN ISOGEN RNA 快速提取试剂 | 100 mL | – | RNA抽提用试剂 医药用外有害物质 |
| 317-02623 | ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂 | 10 mL | – | RNA抽提用试剂 医药用外有害物质 |
| 311-02621 | ISOGEN-LS ISOGEN-LS 液体样本 RNA 抽提试剂 | 100 mL | – | RNA抽提用试剂 医药用外有害物质 |
| 015-22411 | Anti Ago1, Monoclonal Antibody (2A7) Ago1 单抗（2A7） | 50 μL | – | 抗Argonaute（Ago）抗体 |
| 014-22023 | Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗 | 50 μL | – | 抗Argonaute（Ago）抗体 |
| 018-22021 | Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗 | 100 μL | – | 抗Argonaute（Ago）抗体 |
| 011-22033 | Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗 | 50 μL | – | 抗Argonaute（Ago）抗体 |
| 015-22031 | Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 抗小鼠 Ago2 单抗 | 100 μL | – | 抗Argonaute（Ago）抗体 |
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