兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体，无标签
Anti Iba1, Rabbit

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兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞特异性抗体

兔源Iba1抗体，无标签

 


　　Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。

　　该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。

◆特点


●　抗原：对应于Iba1的C末端的合成肽
●　形式：TBS溶液（1 mg/mL）
●　纯化：兔抗血清的抗原亲和层析纯化

●　特异性：对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性，但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。

　　　　　  与人类，小鼠大鼠Iba1反应。
●　用法：1.　抗Iba1，兔（免疫细胞化学）适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用

　　　　  2.　抗Iba1，兔（用于Westernblotting）适合于Western blotting（免疫印迹）。0.5-1 μg/mL使用。



◆应用


大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像


兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

◆免疫印迹实验


兔源Iba1抗体，无标签 Anti Iba1, Rabbit

Lane

1. Iba1 protein (10 ng)

2. 大鼠小胶质细胞 (10 µg)

3. 大鼠神经元 (10 µg)

4. 大鼠大脑皮层 (150 µg)

■ 实验条件

SDS-PAGE：5.5 % stacking gel, 12.5 % running gel, 100V

Blocking：3 % 脱脂奶粉/TBS ，1 h，室温

一抗：抗Iba1抗体(1/1000) ，3 % 脱脂奶粉/TTBS，Overnight，4℃

二抗：过氧化物酶标记抗兔IgG（1/5000），3 % 脱脂奶粉/TTBS，1 h，室温

数据提供：国立研究开发法人　国立精神・神经医疗研究中心　佐栁老师、一戸老师、高坂老师



◆实验步骤


a）石蜡切片

1.　 脱蜡
　　 100％二甲苯10分钟，2次
          ⇓
　　 100％乙醇5分钟，2次
          ⇓
　　 80％乙醇5分钟
          ⇓
　　 70％乙醇5分钟
          ⇓
　　 dH2O，5分钟，2次

2.　用0.01M PBS洗涤，2次

3.　在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟

4. 　用0.01M PBS洗涤，3次

5.　室温（RT）下用封闭缓冲液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小时。

6.　4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体（0.5 μg/mL）（Wako目录号019-19741）孵育过夜。

7.　用0.01M PBS洗涤，3次。

8.　与生物素化的抗兔IgG抗体（1:200）在封闭缓冲液中室温孵育1小时。

9.　用0.01M PBS洗涤，3次。

10.　室温下与Elite ABC试剂（0.01M PBS中的试剂A（1:50）和试剂B（1:50））孵育1小时。

11.　用0.01M PBS洗涤，3次

12.　在过氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris缓冲液的0.01％过氧化氢和0.05％DAB）

b）冰冻切片

　　冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4％多聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后，将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。



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参考文献

产品编号

产品名称

2017年发表文献引用

019-19741

Anti Iba1, Rabbit 

(for   Immunocytochemistry)

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016-20001

Anti Iba1, Rabbit

 (for   Western Blotting)

[1]

Zhang X, Wang D, Pan H, et al.   Enhanced expression of markers for astrocytes in the brain of a line of   GFAP-TK transgenic mice[J]. Frontiers in neuroscience, 2017, 11.

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Barua S, Chung J I, Kim A Y, et   al. Jak kinase 3 signaling in microgliogenesis from the spinal nestin+   progenitors in both development and response to injury[J]. Neuroreport, 2017,   28(14): 929.<链接>

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Roche S L, Ruiz‐Lopez A M,   Moloney J N, et al. Microglial‐induced Müller cell gliosis is attenuated by   progesterone in a mouse model of retinitis pigmentosa[J]. Glia,   2017.

<链接>


产品列表

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
019-19741 Anti Iba1, Rabbit(for Immunocytochemistry)
抗Iba1，兔（免疫细胞化学）		 50 μg 免疫化学 －
016-20001 Anti Iba1, Rabbit (for Western blotting)
抗Iba1，兔（用于免疫印迹）		 50 μg 免疫化学 －
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