细胞死亡 M65® ELISA 试剂盒
M65® ELISA
- 产品特性
- 相关资料
- Q&A
- 参考文献
细胞死亡M65® ELISA试剂盒
M65® ELISA
◆原理
M65® ELISA 检测来自死亡细胞释放的可溶性角蛋白18(K18),可以整体评估细胞的死亡情况,判断是由于细胞凋亡还是细胞坏死引起的细胞死亡。M65® ELISA 最初是为了和 M30 Apoptosense® ELISA 配套使用而设计研发的,后者特异性检测细胞凋亡。两者配套使用,可定量检测总的细胞死亡、细胞凋亡和细胞坏死。 由于 M30 Apoptosense® ELISA 和M65® ELISA 都是用同一标准进行校对的,所以可以评估细胞死亡中细胞凋亡占的比例。 M65® ELISA 可用于检测人血清,并且带有 CE 标记(可用于体外诊断)。 |
◆优点・特色
● 只特异性定量检测上皮细胞整体的死亡情况
● 与 M30 Apoptosense® ELISA 配套使用,定量检测细胞凋亡、细胞坏死和细胞死亡。
● 检测更稳定,特异性更高。
● 夹心法 ELISA 检测,可拆卸的96孔板。试剂即开即用
● 肝脏疾病:检测肝脏疾病患者肝细胞总的死亡情况。可用肝脏疾病检测。
● 肿瘤:监测上皮细胞肿瘤经化疗后肿瘤细胞的死亡情况。
● 毒理学:临床评估不同药物对肝脏细胞的毒性。
◆案例・应用
体内细胞凋亡或者坏死引起肿瘤细胞死亡。细胞死亡的模式取决于细胞毒素刺激的类型和肿瘤的类型。细胞内 ATP 产生缺失通常会引起细胞凋亡,但有时候也会导致细胞坏死 (Leist et al., 1997)。细胞坏死期间,未经 caspase 水解的细胞内蛋白将会释放到细胞外。
角蛋白18(K18)是由很多种上皮细胞高表达的细胞内蛋白。大多数 K18 分子在细胞内是非可溶性的,但也报道有可溶性 K18 池(Chou et al., 1993)。细胞死亡期间,细胞内 K18 会释放到细胞外。检测细胞外可溶性的K18可反映上皮细胞的死亡情况 “过程和原因” (由于细胞凋亡和细胞坏死导致) (Kramer et al., 2004).
K18 在细胞凋亡期间被 caspase 催化发生水解, caspase-cleaved 片段释放到细胞外。因此细胞外的 caspase-cleaved K18(ccK18)浓度反映了细胞凋亡的数量。而且M30:M65 比代表了总细胞死亡中细胞凋亡的比例(不同 “M30:M65 比”) (Kramer et al., 2004).
M65 EpiDeath® ELISA 使用两种IgG型的K18小鼠单抗,评估人血清或则血浆中上皮细胞死亡情况。M30 Apoptosense® ELISA 特异性检测在caspase-cleavage d K18 在Asp396形成的新表位 (K18Asp396-NE 或者M30 neo-epitope) ,反映上皮细胞的凋亡情况(Hägg et al. 2002; Bivén et al. 2003)。两种检测试剂盒的单位根据同一标准校对,可以计算caspase-cleaved 和总K18 (“M30:M65 比例”)。培养细胞诱导细胞凋亡导致caspase-cleaved K18释放,M30:M65 比值较高, 然而如果细胞发生死亡,只有K18的水平是升高的,所以M30:M65 比值较低。
体内或体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死)。与M30 Apoptosense® ELISA kit 联用可以检测上皮细胞凋亡在整个细胞死亡中所占的比例。
◆产品信息
M65® ELISA kit (CE-Mark) 体内,体外实验中,定量检测总的细胞死亡(凋亡和坏死) 。
特异性 |
人 |
样品类型 |
含有从死亡细胞中释放的CK18的血清或者血浆(EDTA,citrate,heparin plasma) |
灵敏度 |
11 U/L, Standard A(0 U/L)+2 S.D. |
范围 |
125-2,000 U/L |
检测目标物 |
完整的CK18和可溶性caspase酶解的CK18(ccCK18/CK18F/CK18Asp396-NE/M30) |
特点 |
可进行定量检测;预铺ELISA 板(可拆卸)、即用试剂,操作方便;可用于自动化 |
稀释线性 |
用M65 Standard A 稀释,平均值是126%(范围116-139%);用血清稀释,平均 值 是120%(范围101-133%) |
M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA的区别,请参考相关资料。
更多运用案例
M65 EpiDeath® ELISA 和M65® ELISA的比较
M65 EpiDeath® ELISA 和M65® ELISA的运用完全一致。
检测的样品类型一致,检测的目标物一致。
M65 EpiDeath® ELISA与 M65® ELISA使用相同的单抗。为了与 M30 Apoptosense® ELISA匹配,使用单抗 M5 作为捕获抗体(在M65® ELISA使用单抗M6)。
M65 EpiDeath® 与 M65® ELISA相似和区别:
● M65 EpiDeath® ELISA 可以更好的区分健康人群和病患(患有导致循环角蛋白18(K18)增加的疾病)。这是由于该试剂盒中的抗体有更好的结合特异性,在健康人群中检测到的值更低。
● M65 EpiDeath® ELISA 和 M65® ELISA 检测含有 K18 的病患样品,检测值差不多(见图中提供的资料,相关性系数 r²= 0,84). 这些检测的主要区别是用 M65® ELISA 检测,检测值在 200–300 U/L 范围内的样品用 M65 EpiDeath® ELISA 检测,检测值<100 U/L 。
● 由于 M65 EpiDeath® 和 M65® ELISA 检测同一样品,检测值不一样,所以如果是特定的实验/项目,只能使用其中一种试剂盒。
● M65 EpiDeath® 的检测范围是 0~5000U/L, M65® ELISA的检测范围是 125~2000U/L。
使用 M65 EpiDeath® 和 M30 Apoptosense® ELISA 确认细胞死亡形式
M65 EpiDeath® ELISA 和 M30 Apoptosense® ELISA 使用相同的捕获抗体,使用 M30 Apoptosense® 和 M65 EpiDeath® ELISA 检测 “M30:M65 比” (见Kramer et al., 2004) 希望反应细胞死亡形式。有些案例中,用 M30 Apoptosense® ELISA 检测,样品的值高于用 M65 EpiDeath® ELISA 检测, 可能反应了表位如何在复合体中递呈。
注意: “M30:M65 比” 只有在 K18 含量提升的样品(比如,用 M65 EpiDeath® ELISA 检测值>300 U/L )有意义。(见 Linder et al., Expert Reviews in Molecular Diagnostics 10, 353, 2010).
相关文章:
PEVIVA M30与M65试剂盒联用,判断细胞死亡形式
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 | 备注 |
10020 | M65® ELISA 细胞死亡M65 ® ELISA试剂盒 |
96 wells |
免责声明 |
1. 本公司密切关注本网站发布的内容,但不保证发布内容的准确性、完整性、可靠性和最新性等。 2. 本公司不保证使用本网站期间不会出现故障或计算机病毒污染的风险。 3. 无论何种原因,使用本网站时给用户或第三方造成的任何不利或损害,本公司概不负责。此外,对于用户与其他用户或第三方之间因本网站发生的任何交易、通讯 3. 或纠纷,本公司概不负责。 4. 本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗,仅可用于科研等非医疗目的。如任何用户将本网站提供的产品和服务用于临床诊断或治 4. 疗,以及其他特定的用途或行为,本公司概不保证其安全性和有效性,并且不负任何相关的法律责任。 |