Discover-sc Single Cell WGA Kit V2
均一性好,稳定性优的单细胞基因组扩增试剂盒
单细胞基因组扩增
Discover-sc Single Cell WGA Kit V2使用基于MDA的等温扩增体系,可以以单个细胞或者微量样本为模板实现全基因组的无差别扩增。单细胞基因组经扩增后可达到95%以上的覆盖度,扩增产物大小在2 – 100 kb之间,平均产物长度大于15 kb,可广泛适用于全基因组和外显子测序、大片段拷贝数变异分析、微卫星分析、qPCR分析、基因芯片分析。
本试剂盒使用的Phi29 DNA聚合酶是从噬菌体中克隆的DNA聚合酶,具有很强的链置换活性,可以实现复杂结构的DNA解链与复制;同时Phi29 DNA聚合酶具有很强的链亲合力,单次聚合反应可以实现长达100 kb的连续聚合延伸,其扩增产物适用于几乎所有的下游应用;与基于PCR的方法相比,Phi29 DNA聚合酶具有很强的3' – 5'的外切酶活性,其保真度是Taq酶的1,000倍,从而保证了DNA合成的高保真性。
均一性优:定向进化Phi29酶,扩增更均一
以PBMC(5-6个)、人gDNA(1 ng)为模板,使用Vazyme #SC101、Vazyme #N603以及其他同类型产品进行扩增,使用Vazyme #TD502对扩增产物进行文库构建。采用PE150测序策略,一共测2G数据量;截取0.5 M reads,以600 kb作为bins,进行PGS流程分析。
下机数据结果显示:Vazyme #SC101的SD值均显著低于N603及其他公司同类产品;散点分布图显示,reads在基因组各部位分布得比较均匀,表明Vazyme #SC101扩增均一性好,可用于大片段拷贝数变异分析。
图1 SC101及其他同类型产品的SD_original比对
图2 全基因组拷贝数分布图
-30 ~ -15℃保存,干冰运输。如需更长期则-85 ~ -65℃保存 ,干冰运输。