VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina V2
升级版small RNA文库构建试剂盒,兼容更低的样本投入量,特殊样本建库效果更好
样本兼容类型广:动植物总RNA、特殊样本(血清、血浆、外泌体)RNA、FFPE总RNA、分离纯化的small RNA
兼容低起始量样本:动植物总RNA 10 ng-1 μg,血清、血浆、外泌体RNA≥1 ng
特殊样本建库成功率提高:血清、血浆、外泌体RNA建库成功率提高
有效文库转化率高:3’接头连接效率与逆转录效率提高,提升了有效文库产出
下机数据质量佳:表达重复相关性好,miRNA检出种类提高
VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina V2是针对Illumina高通量测序平台定向开发的small RNA文库构建专用试剂盒,本试剂盒在原有版本的基础上进行了体系优化,提升了试剂盒的稳定性及低投入量下文库产出。本试剂盒适用于模板起始量为10 ng-1 μg的动、植物总RNA,以及≥1 ng分离纯化的血清、血浆、外泌体RNA。small RNA的3’和5’端分别连上通用接头,再经过逆转录、 PCR扩增以及PAGE胶或磁珠纯化等步骤,最终得到适用于Illumina平台的测序文库。试剂盒包含文库构建所需的所有酶和缓冲液,所有组分都经过了严格的质量控制和功能验证,较大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。
1. 广泛的物种兼容性与投入量兼容性
以1 μg、100 ng、10 ng动物样本(小鼠肝脏)、细胞样本(Hela细胞)、植物样本(大豆、玉米、水稻)总RNA为起始模板,参照NR811建库流程进行文库构建,使用 Qubit 检测文库浓度。
图1 不同物种和投入量下NR811文库产出浓度
结果显示,在不同物种和投入量下,NR811均能成功构建文库,且文库浓度正常,表明NR811可以兼容各种类型样本,并能兼容更低的投入量。
2. 特殊样本建库效果好
以6 μl血浆、血清、外泌体总RNA,及10 ng FFPE样本RNA和10 ng小鼠肝脏small RNA为起始模板,参照NR811及友商公司同类产品建库流程进行文库构建,使用 Qubit 检测文库浓度。
图2 NR811与友商公司同类产品在特殊样本上的文库产出浓度
结果显示,NR811在不同类型的特殊样本上均有更好的建库效果。
RL5 Adaptor,-85 ~ -65℃保存,干冰运输;
Filtration Column,15 ~ 25℃保存,室温运输;
其余组分,-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。