抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒 TRAP Staining Kit
TRAP Staining Kit
Introduction
The TRAP Staining Kit (Cat.No.PMC-AK04F-COS) is used for the staining of Tartrate-Resistant Acid Phosphatase in osteoclasts. Bone mass is controlled by the balance between the activity of osteoblasts bone formation and the activity of osteoclasts. Alkaline phosphatase (ALP: ALP staining kit, Cat.No.PMC-AK20-COS) and tartrate-resistant acid phosphate are used as markers for osteoblasts and osteoclasts, respectively.
Components
| Component | Quantity | Storage |
| Tartrate-containing Buffer | 50mL | 4ºC
Do not freeze |
| Chromogenic Substrate | 10vials | 4ºC |
One kit contains regents for 10 × 96-well plates
Additional Materials Required
・10% Formalin Neutral Buffer Solution
・Phosphate Buffered Saline (PBS)
・Distilled or deionized water
Protocol (96-well plate format)
- Removeculture Wash each well once with 100uL of PBS.
- Add50uL of the 10% Formalin Neutral Buffer Solution to each well and fix for 5 minutes at room
- Washeach well with 250uL of deionized (× 3 times)
- Dissolve1 vial of Chromogenic Substrate with 5mL of Tartrate-containing
- Add50uL of Chromogenic Substrates to each
- Incubateat 37℃ for 20-60 Adjust incubation time until stained TRAP is clearly showing the result in figure 1.
- Washwith deionized water to stop the
Note: Excess incubation will be cause of over stained.
TRAP Staining Kit 可用于破骨细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。骨量是由成骨细胞和破骨细胞两者间的活性平衡来控制的。
碱性磷酸酶（ALP 染色试剂盒，Cat.No. PMC-AK20-COS）和抗酒石酸酸性磷酸分别是成骨细胞和破骨细胞的标记物。
◆试剂盒的组成
| 组成 | 数量 | 保存 |
| Tartrate-containing Buffer | 50 mL | ４°C (不用冻结) |
| Chromogenic Substrate | 10 vials | ４°C |
盒内试剂的量可用于 10×96 孔板
#其他所需的材料
● 10％福尔马林中性缓冲液
● 磷酸盐缓冲盐水（PBS）
● 蒸馏水或去离子水
◆步骤（96-孔板规格）
1. 去除培养基。用 100 μL 的 PBS 清洗每个孔。
2. 添加 50 μL 10％的福尔马林中性缓冲溶液至每个孔板里，并在室温下放置５分钟。
3. 用 250 μL 的去离子水清洗每个孔板。 (×３次)
4. 用５mL 酒石酸盐缓冲液溶解1瓶
5. 添加 50 μL 的显色底物至每个孔板内。
6. 在 37℃ 下孵育 20-60 分钟。调节孵育时间直到 TRAP 染色结果能清晰地显示在图１中。
7. 用去离子水冲洗以终止反应。
注意: 孵育时间过长会导致过度染色显色底物。
图 1: 破骨细胞TRAP染色
◆相关产品相关资料
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| PMC-AK20-COS | Alkaline Phosphatase Staining Kit 碱性磷酸酶染色试剂盒 |
1 kit |
TRAP Staining Kit [PMC-AK04F-COS]
TRAP Staining Kit可用于破骨细胞里的抗酒石酸酸性磷酸酶的染色。
Stains All Gel Staining Kit for Acidic Proteins [PMC-AK02-COS]
该试剂盒专门设计用来染色调节骨骼钙化的强酸性蛋白如：如骨钙素、骨桥蛋白和BSP二强酸性蛋白质。
Adipocyte Fluorescent Staining kit [PMC-AK19F-COS]
用氟硼荧和通过H33258荧光染色的细胞核来染色细胞里的脂肪球。
Pancreatic beta-cell Fluorescent Staining Kit [PMC-AK11F-COS]
Acidic Mucopolysaccaride Assay Kit [PMC-AK03-COS]
DNA Quantity Kit [PMC-AK06-COS]
DNA 不通过从培养细胞里提纯也可以进行量化。
TypeI collagenase assay kit [PMC-AK37-COS]
Lipid Assay Kit [PMC-AK09F-COS]
此试剂盒（油红的oilphilic红色染料）染色细胞内的油滴，并且用有机溶剂萃取法能够量化油量
GPDH Assay Kit [PMC-AK01-COS]
该试剂盒在测定酶活性方面，比传统方具有更高的稳定性和再现性等优势。
Alkaline Phosphatase Staining Kit [PMC-AK20-COS]
这是用于成骨细胞的碱性磷酸酶的染色。
Calcified nodule Staining kit [PMC-AK21-COS]
POLARIC [PMC-AK12-COS]
用于活细胞的溶剂变色荧光
Gelatin zymography kit [PMC-AK47-COS]
MMP Marker [PMC-AK38-COS]
◆TRAP 染色试剂盒常见问题
Q１： 该款试剂盒是否可用于石蜡包埋的组织？
A１： 非常抱歉，我们没有用这个做过石蜡包埋的组织。如果样品含有福尔马林的话，也不能用。
Q２： 操作说明书是可以做 10×96 孔板实验。能否介绍一下使用６孔板的步骤？
A２： 请使用 96 孔板的 30 倍试剂。比如显色试剂的量是1.5mL。
Q３： 是否可以染巨噬细胞？
A３： 可以。
Q４： 进行免疫荧光实验时，是否可以一起使用？如果可以，请告知实验流程。
A４： 我们没有用该试剂盒同时进行免疫荧光实验。
Q５： 如果显色底物溶解的话，在４℃可以保存多久？
A５： 非常抱歉，显色底物不能溶解后保存。最好现配现用。显色底物提供３mg/瓶，有 10 瓶。
Q６： 能够提供小包装？
A６： 目前不行。
参考文献
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| ［2］ | Hase, H., Kanno, Y., Kojima, H., Sakurai, D., Kobata, T. Coculture of Osteoclast Precursors With Rheumatoid Synovial Fibroblasts Induces Osteoclastogenesis via Transforming Growth Factor beta-Mediated Down-Regulation of Osteoprotegerin. Arthritis Rheum. 58, 3356-3365（2008） |
| ［3］ | Cao, H., Kuboyama, N. A Biodegradable Porous Composite Scaffold of PGA/beta-TCP for Bone Tissue Engineering. Bone. 46, 386-395 (2010) |
| ［4］ | Okada, Y., Hamada, N., Kim, Y., Takahashi, Y., Sasaguri, K., Ozono, S., Sato, S. Blockade of Sympathetic beta-receptors Inhibits Porphyromonas Gingivalis-induced lveolar Bone Loss in an Experimental Rat Periodontitis Model. Arch. Oral Biol. 55, 502-508 (2010) |
| ［5］ | Okamoto, A., Ohnishi, T., Bandow, K., Kakimoto, K., Chiba, N., Maeda, A., Fukunaga, T., Miyawaki, S., Matsuguchi, T. Reduction of Orthodontic Tooth Movement by Experimentally Induced Periodontal Inflammation in Mice. Eur. J. Oral Sci. 117, 238-247 (2009) |
| ［6］ | Fujiwara, T., Fukushi, J., Yamamoto, S., Matsumoto, Y., Setsu, N., Oda, Y., Yamada, H., Okada, S., Watari, K., Ono, M., Kuwano, M., Kamura, S., Iida, K., Okada, Y., Koga, M., Iwamoto, Y. Macrophage Infiltration Predicts a Poor Prognosis for Human Ewing Sarcoma. Am. J. Pathol. 179, 1157- 170 (2011) |
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| PMC-AK04F-COS | TRAP Staining Kit
抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒 |
10 PLATE |
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