KAPA 核糖体去除链方向性RNA文库准备试剂盒
为转录组测序提供了一个高质量、完整的解决方案采用酶消化靶序列的方法,该试
剂盒能更好地减少核糖体RNA (rRNA),从而提取更完整的转录组信息,包括mRNA前
体和非编码RNA (ncRNA)。
该试剂盒采用KAPA HiFi酶,用于文库扩增,有高效率、低偏好性的特点。全试剂盒
的工作流程简化,采取”with bead”的操作。
1、产品应用
●高质量和低质量的RNA样本(例如从FFPE组织提取的)基因表达分析。
●单核苷酸变异(SNV)的发现。
●剪接位点和融合基因的识别。
●不带poly尾的RNA的特性分析,包括非编码RNA和前提RNA。
2、产品优势
●高达99.98% rRNA去除效率 ●起始总RNA范围为100ng~1μg
●适用物种为人、小鼠、大鼠 ●不同起始量均能得到可靠的、可重复结果
●工作流程易于实现自动化,已有多种自动平台的对接方案。
3、优势表现
1)行业领先的rRNA去除效果。能从FFPE样本中有效去除rRNA减少rRNA reads,测序更经济,转录本测序深度更深
2)最大的覆盖均一性
●各转录本读序(reads)分布均一
●5’-3’的偏好性小
3)无与伦比的测序数据质量
●检测更多基因和特定转录本
●准确、清晰地识别剪切位点和选择性剪切基因
●覆盖度高,能更好地检测困难或GC含量高的转录本
采用KAPA Stranded RNA-Seq Kit with RiboErase工作流程所取得的高质量测序数据,同Illumina、NEB相似试剂盒的对比结果;
KAPA Stranded RNA-Seq Kit with RiboErase的工作流程不仅获得同类别试剂盒同等的测序读序映射率,同时重复率(duplication rates)低,覆盖均一性高,并且检测到更多数量的特异的转录片段和基因,从而使在样本中探测表达基因的灵敏度得到提高。
GC富集的转录片段的覆盖度提高:
上图显示haemoglobin alpha transcript(HBA1)的测序覆盖度和剪切位点识别情况.HBA1的GC含量为62.8%.图中显示GC含量的轨道行将GC含量高的区域标注为红色.AT含量高的区域标注成蓝色,经过KAPA Stranded RNA-Seq Kit with RiboErase工作流程处理的样本(绿色),和与同类的Illumina试剂盒(橙色)或NEB试剂盒(蓝色)处理的样本相比,具有更均一的覆盖度,更灵敏的剪切位点识别,并且具有和未经rRNA处理样本(红色)相比更有代表性的数据图形样貌。
低丰度转录片段的检测率提高:
MALAT1,一个低丰度非编码RNA片段,在文库制备过程中运用KAPA Stranded RNA-Seq Kit with RiboErase(绿色)其片段序列和剪切位点均能够被均一的覆盖,相比之下,使用Illumina-ZeroGold(橙色)和NEBNext(蓝色)的工作流程所得到的该转录片段的覆盖度的均一性较低。
4)可高度重复的测序结果
●即使测试条件不同仍热有很高的相关性
●样本间差异小,结果可靠
重复样本之间基因表达水平的相关性:以上实验均使用100ng和UHR总RNA作为起始样本。使用KAPA Stranded RNA-Seq Kit with RiboErase的工作流程进行建库时,基因表达水品在重复样本之间显示出非常高的相关性(R2>0.973)高于使用Illumina或NEB同类试剂盒进行建库的情形。
5、产品信息
货号 | 产品 | 规格 |
KK8483 | KAPA Stranded RNA Seq Kit with RiboErase (Human/Mouse/Rat)- Ilumina platforms KAPA链方向性RNA文库准备试剂盒(含核糖体去除) – Ilumina 平台 |
24个文库 |
KK8484 | KAPA Stranded RNA Seq Kit with RiboErase (Human/Mouse/Rat)- Ilumina platforms KAPA链方向性RNA文库准备试剂盒(含核糖体去除)一Illumina 平台 |
96个文库 |
KK8560 | KAPA RNA Hyper Kit with RiboErase (Human/Mouse/Rat) -illumina platforms KAPA RNA Hyper文库构建试剂盒(含核糖体去除) – ilumnina平台 |
24个文库 |
KK8561 | KAPA RNA Hyper Kit with RiboErase (Human/Mouse/Rat) -llumina platforms KAPA RNA Hyper文库构建试剂盒(含核糖体去除)一illumina平 台 |
96个文库 |